對(duì)于多功能酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有什么特殊要求

　　多功能酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器又稱微孔板檢測(cè)器?？珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。測(cè)定一般要求測(cè)試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試，因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

　　酶標(biāo)儀的工作原理與光度比色計(jì)類似，主要分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩類；半自動(dòng)在測(cè)量時(shí)需要手動(dòng)調(diào)節(jié)孔版，而全自動(dòng)則不需要，儀器可自動(dòng)成排檢測(cè)。主要用于ELISA測(cè)定，由于ELISA測(cè)量對(duì)于樣品體積有要求，普通的光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試。

　　對(duì)于多功能酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有什么特殊要求：

　　1、將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品對(duì)應(yīng)的微孔編號(hào)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品做雙孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置。

　　2、在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50µl各標(biāo)準(zhǔn)品溶液，酶標(biāo)儀在各樣品孔中加入50µl樣品溶液。

　　3、在所有孔中加入50µl的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境中避光反應(yīng)30分鐘。

　　4、小心揭開蓋板膜，甩干孔中液體，用稀釋好的洗滌液（250μl/孔）充分洗滌微孔板3次，在吸水紙上拍干（拍干后未清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。

　　5、酶標(biāo)儀在所有孔中加入100µl的酶標(biāo)二抗，酶標(biāo)儀用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境中避光反應(yīng)30分鐘。取出酶標(biāo)板，按步驟4洗板5次。

　　6、洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50µl底物液A，再加50µl底物液B，輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻，25℃環(huán)境避光顯色15分鐘(在顏色淺的情況下可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，但總顯色時(shí)間不要超過(guò)30分鐘)。

　　7、每孔中加入50µl終止液，輕輕晃動(dòng)使之*混勻，在450nm（建議使用雙波長(zhǎng)450/630nm）下檢測(cè)吸光度，結(jié)果在5分鐘內(nèi)讀取。